VEGF、S-100P及clusterin在腱鞘巨细胞瘤中的表达情况及临床意义

摘    要：目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、钙结合蛋白100(S-100P)及丛生蛋白(clusterin)在腱鞘巨细胞瘤中的表达情况及临床意义。方法 以2018年8月至2021年2月在四川省骨科医院就诊的腱鞘巨细胞瘤患者72例作为观察组，另选择同期在成都市416医院行健康体检的良性纤维病变者72例作为对照组，应用免疫组织化学法检测VEGF、S-100P及clusterin水平，并比较不同病理特征患者之间的差异。结果 观察组VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平明显高于对照组(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤部位患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05);不同局限性、包膜及肿瘤最大径患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。通过相关性分析，患者的VEGF、S-100P及clusterin水平与疾病的局限性、包膜及肿瘤最大径呈正相关(r=0.321～0.852,P<0.05)。结论 腱鞘巨细胞瘤与VEGF、S-100P及clusterin的表达相关，VEGF、S-100P及clusterin可能与腱鞘巨细胞瘤的包膜不完整及弥漫等病理特征有一定关系。

关键词:腱鞘巨细胞瘤;血管内皮生长因子;钙结合蛋白100;丛生蛋白;病理特征;相关性;

腱鞘巨细胞瘤是临床较为常见的四肢肿物，其主要起源于腱鞘及肌腱之间的滑囊细胞，疾病进展较为缓慢，多为良性[1]。有研究者将腱鞘巨细胞瘤作为炎性反应性疾病[2]。而在2013年世界卫生组织将其称之为纤维组织细胞性肿瘤[3]。钙结合蛋白100(S100P)通过对钙离子依赖性信号通路的介导作用，影响肿瘤细胞的增殖与分化。血管内皮生长因子(VEGF)可通过调控局部病灶部位的肿瘤组织的新生血管，进一步对肿瘤细胞的浸润作用进行调控[4]。丛生蛋白(clusterin)又名睾酮抑制性前列腺信使-2,其与恶性肿瘤疾病的相关研究较多，但是与腱鞘巨细胞瘤的研究较少[5]。本研究主要通过腱鞘巨细胞瘤的免疫组织化学法研究及VEGF、S-100P及clusterin的表达规律对患者病理类型的诊断进行分析，为临床诊断提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究为前瞻性研究，以2018年8月至2021年2月在四川省骨科医院就诊的腱鞘巨细胞瘤患者72例作为观察组，其中男23例，女49例；年龄24～65岁，平均(40.00±11.14)岁；体质量指数(24.85±2.69)kg/m2;手足关节部位29例，膝关节31例，踝关节12例；局限型51例，弥漫型21例；完整包膜29例，不完整包膜43例。另选择同期成都416医院行健康体检的良性纤维病变者72例作为对照组，其中男27例，女45例；年龄24～65岁，平均(40.44±11.61)岁；体质量指数(24.66±2.62)kg/m2。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。所有患者均签署知情同意书，并经伦理委员会论证通过。

观察组纳入标准：(1)符合腱鞘巨细胞瘤诊断标准[6];(2)入组前未进行抗肿瘤治疗；(3)签署知情同意书。排除标准：(1)严重心脏、肝、肾功能障碍；(2)中途退出本研究。

1.2 研究方法

分别对观察组及对照组的病变组织进行采集，采用10%中性甲醛水溶液固定，常规脱水，石蜡包埋后进行连续切片，切片的厚度设定为4 μm, 采用pH6.0的柠檬酸修复液对石蜡切片进行脱蜡及脱水，采用高压加热法对抗原进行修复。分别采用1∶100的VEGF、S-100P及clusterin抗体进行滴加，在4 ℃下进行孵育过夜，采用多聚物酶标二抗进行滴加后，在37 ℃下孵育45 min, 采用DAB进行显色，苏木精进行复染。细胞浆内出现棕黄色或棕褐色颗粒物即为VEGF、S-100P及clusterin阳性。采用染色强度及阳性细胞的二级计数法对VEGF、S-100P及clusterin进行评分，无染色则为0分，淡黄色则为1分，黄褐色则为2分，深褐色则为3分。阳性细胞数目比例为<10%则为0分，10%～25%则为1分，>25%～50%则为2分，>50%～100%则为3分。染色强度及染色比例的评分乘积可作为以上蛋白表达程度的评价依据，<6分以下为低表达，≥6分则为高表达[7]。

1.3 观察指标

1.3.1 两组患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较

分别对观察组及对照组VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平进行分析。

1.3.2 不同病理特征患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较

分别对不同病灶部位、性别、年龄、病变程度、包膜完整性患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平进行比较。

1.4 统计学处理

采用SPSS16.0统计软件进行数据处理及统计分析。呈正态分布的计量资料以x¯±s表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验；计数资料以频数或百分率表示，组间比较采用χ2检验；采用Spearman相关性分析对VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平与局限性、包膜及肿瘤最大径的相关性进行分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较

观察组VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平明显高于对照组(P<0.05),见表1。

2.2 不同病理特征患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较

不同性别、年龄、肿瘤部位患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05);不同局限性、包膜及肿瘤最大径患者VEGF、S-100P及clusterin相对表达水平比较，差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

2.3 相关性分析

通过相关性分析，患者VEGF、S-100P及clusterin与疾病局限性、包膜及肿瘤最大径呈正相关(r=0.321～0.852),见表3。

3 讨 论

腱鞘巨细胞瘤主要是起源于腱鞘及关节滑膜层的良性病变，好发于手指、足部的腱鞘滑膜组织及小关节。有研究报道指出，腱鞘巨细胞瘤也可发生于臀部、腕部及肩部[8]。腱鞘巨细胞瘤高发于30～50岁，女性患者发病率明显高于男性。在疾病进展中，肿瘤生长速度较为缓慢，结节的大小在多年内可维持在一定大小。2013年世界卫生组织将其定义在纤维组织细胞瘤范畴[9]。目前，按照肿瘤生长方式，可以将其分为局限型及弥漫型两种类型。局限型腱鞘巨细胞瘤主要发生在手部及腕关节，其比例可达65%～89%[9,10]。在手部病变部位中，主要以食指及中指作为主要病灶部位，而膝关节等下肢部位的腱鞘巨细胞瘤发病较少。

VEGF主要位于机体6号染色体中，通过基因编码形成VEGF蛋白，可与血管内皮细胞特异性结合，促进血管生长因子形成[7]。本研究中，观察组VEGF相对表达水平明显高于对照组，且随着肿瘤最大径增大及局限性改变，VEGF相对表达水平明显上升。在疾病的进展中，当突破包膜及局限性降低时，肿瘤细胞的增殖需要获取较多的氧气及营养物质，新生的毛细血管代偿性增多，但是在新生毛细血管的形成过程中，由于受到局部病灶部位的肿瘤细胞及炎性细胞的双重影响，病灶部位的血管内皮功能发生明显紊乱，进一步造成内皮细胞特异性表达VEGF[11]。而局部病灶部位的血管密度分析虽然可以在一定程度上反映局部病灶部位的血管形成情况，但是其对病灶部位的采样具有明显依赖性。S-100P在肿瘤细胞的异常表达与患者肿瘤细胞的生长、浸润及转移密切相关[10]。本研究中，观察组S100P相对表达水平较对照组明显升高，且不同局限性、包膜及肿瘤最大径患者S-100P相对表达水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。有研究报道认为，腱鞘巨细胞瘤患者组织中基因启动子区域的甲基化状态与患者的浸润程度及临床分型存在一定相关性，局部病灶部位的甲基化状态情况越高，患者的浸润程度及临床分型严重程度越高[12]。clusterin是从睾丸液体中分离得到，在多种肿瘤组织中呈现较高表达水平，同时在组织重建、结构重建、扩膜转运对巨噬细胞具有趋势化，在一定程度上促进了肿瘤细胞进展。在本研究中，虽然腱鞘巨细胞瘤不是恶性肿瘤，多数为良性肿瘤，但是观察组clusterin相对表达水平明显高于对照组，且clusterin与疾病的局限性、包膜及肿瘤最大径呈正相关，说明clusterin在腱鞘巨细胞瘤的疾病进展中发挥重要作用。

综上所述，腱鞘巨细胞瘤与VEGF、S-100P及clusterin表达可能相关，VEGF、S-100P及clusterin与腱鞘巨细胞瘤的包膜不完整弥漫型、局限性、肿瘤最大径等病理特征可能存在一定关系。

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